فایل بررسی ژنهای HSP70،HPa ، BaBA2 هلیکو باکتر پیلوری در بیماران دیسپپسی
توضیحات
فایل بررسی ژنهای HSP70،HPa ، BaBA2 هلیکو باکتر پیلوری در بیماران دیسپپسیاین پایان نامه در قالب فرمت word قابل ویرایش ، آماده پرینت و ارائه به عنوان پروژه پایانی میباشد چکیده مقدمه: هليكو باكتر پيلوري از مهمترین پاتوزن های معده در انسان می باشد. ژن هاي BabA2 Hpa HsP, در اتصال به سلولهای اپیتلیال معده و بیماریزایی باکتری ضروری می باشند.ميزان فراواني اين ژن ها در مناطق جغرافيايي مختلف متفاوت است. هدف از اين مطالعه ارزیابی فراوانی ژن هايBabA2 ، Hsp Hpa در ايزوله هاي هليكو باكتر پيلوري جدا شده از بيوپسي هاي معده و ارتباط آنها با گاستريت، اولسر و سرطان معده صورت گرفت. روش بررسي: نمونه بيوپسي معده توسط متخصص گوارش از بيماران مبتلا به اختلالات گوارشی گرفته شده ویك نمونه به منظور انجام تست اور ه آز و بررسی هیستو پاتولوژی و نمونه دیگر به منظور استخراجDNA به آزمايشگاه ارسال شد. پس از استخراجDNA فراوانی ژن هاي Hpa,BabA2، Hpa با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي آنها وروش مولکولی PCR بررسي شدند. يافته ها: در بين 80 بيمار آلوده به هليكو باكتر پيلوري، 36 بيمار دچار گاستريت، 18 بيمار دچار سرطان معده، و 26 بيمار دچار زخم معده بودند واز 80 نمونه بيوپسي معده مورد بررسي، 51 نمونه (63%) از نظر ژن مثبت بودند. فراواني ژن BabA2 در هلیکو باکتر پیلوری جدا شده از بیوپسی بیماران در سرطان معده (8/13%) و در گاستريت (2/26%) و زخم معده (8/23%) بود.و همچنین 49نمونه (61%) از نظرژن Hsp مثبت بودند. 49نمونه (61%) از نظرژن Hsp مثبت بودند. فراواني ژن Hsp در هلیکو باکترپیلوری جدا شده از بیوپسی بیماران مبتلا به سرطان معده (10%)، مبتلا به گاستريت (2/26%) و مبتلا به زخم معده (25%) بوده است 49نمونه (61%) از نظرژن Hsp مثبت بودند. فراواني ژن Hsp در هلیکو باکترپیلوری جدا شده از بیوپسی بیماران مبتلا به سرطان معده (10%)، مبتلا به گاستريت (2/26%) و مبتلا به زخم معده (25%) بوده است بیماران مبتلا به سرطان معده (10%)، مبتلا به گاستريت (2/26%) و مبتلا به زخم معده (25%) بوده است همچنین 57 نمونه (2/71%) از نظر ژن Hpaمثبت بودند. فراوانی ژن Hpa درهلیکوباکتر پیلوری جدا شده از بیوپسی بیماران مبتلا به سرطان معده (12%) و مبتلا به گاستریت (31%) وزخم معده (5/27%) بوده است .ا رتباط معنی داری بین حضور این ژن ها و نوع پاتولوژی معده مشاهده نشد.(p>0/05 ) نتیجه گیری: در این مطالعه فراواني ژن های babA2, hpa و hsp در نمونه هاي زخم معده و گاستریت بيشتر بود. و لی رابطه معني دار آماری بين حضور ژن ها و نوع پاتولوژی ناشي از هليكو باكتر پيلوري مشاهده نشد. علت تفاوت فراوانی این ژن ها در مطالعات مختلف می تواند ناشی از تفاوت در تنوع جغرافیایی یا استفاده از پرایمر های مختلف جهت ردیابی این ژن ها باشد. واژه هاي كليدي: هليكو باكتر پيلوري، ژنBabA2 ، ژن Hpa, ژن Hsp زخم پپتیک , سرطان معده فهرست مطالب عنوان:بررسی فراوانی ژن های Hsp70,Hpa,BabA2 هلیکوباکتر پیلوری درافرادمبتلابه دیسپپسی بیمارستان پنج آذر گرگان در سال 1391 چكيده فصل اول كليات صفحه مقدمه 6 تاريخچه كشف هليكوباكتر پيلوري 8 تاكسونومي طبقه بندي 11 1-2-1 گونه هاي هليكوباكتر 13 1-2-1-1 هليكو باكترهاي معدي 14 1-2-1-2 هليكو باكترهاي روده اي 14 1-3 اختصاصات ميكروبيولوژي هليكو باكتر پيلوري 18 1-3-1 مورفولوژي 19 1-3-2 ساختمان ژنتيكي 20 1-3-3 فيزيولوژي و متابوليسم 21 1-3-4 ساختار ديواره سلولي 22 1-3-4-1 ساختار پپتيدو گليكان 23 1-3-4-2 غشاي خارجي 23 1-3-5 ساختار آنتي ژنيك 23 1-4 جايگاه هليكو باكتر پيلوري 24 1-5 كلونيزاسيون هليكو باكتر پيلوري 25 1-5-1-1 لكتين هاي (هماگلوتينين) سياليك اسيد 26 1-5-1-2 ادهزين هاي متصل شونده به Lewis b 27 1-5-1-3 آدهزين هاي متصل شونده به ليپيد و سولفات 28 1-5-1-4 نقش لييپو پلي ساكاريد در چسبندگي 28 1-5-1-5 نقش HSPs هليكو باكتر پيلوري در چسبندگي 28 1-5-1-6 نقش OMPs در چسبندگي 28 1-5-1-5 نقش (neutrophil – activating protein) NapA در چسبندگي 29 1-6 فاكتورهاي بيماريزا 31 1-6-1 اوره آز 31 1-6-2 لييپو پلي ساكاريد و نقش آن در بيماريزاي 32 1-6-3 پروتئين (cytotoxinn – associated gene) CagA 32 1-6-4 نقش CagA در سرطانزايي معدي 32 1-6-5 VacA (سيتوتوكسين واكوئله كننده) 33 1-6-6 IceA 34 1-6-7 نقش حركت و شكل مارپيچي باكتري در بيماريزايي 34 1-6-8 ساير آنزيم هاي هليكو باكتر پيلوري 35 1-6-8-1 كاتالاز 35 1-6-8-2 فسفوليپاز 35 1-6-8-3 پروتئاز 35 1-6-9 جذب آهن 36 1-7 مكانيسم بيماريزايي 37 1-8-ايمني زايي توسط هليكو باكتر پيلوري 40 1-9 تظاهرات باليني 41 1-10 ارتباط بيماريهاي مختلف هليكو باكتر پيلوري 44 1-10-1 بيماري هاي عروق قلبي 44 1-10-2 كم خوني فقر آهن 44 1-10-3 سرطان حنجره 45 1-11 تشخيص 45 1-11-1 روش تهاجمي (Invasive) 46 1-11-2 غير تهاجمي (Non-Invasive) 50 فصل دوم مواد مورد نياز و روش كار 2-1 جامعه مورد مطالعه 54 2-2 مواد مصرفي و روش انجام آزمايش 55 2-2-2 مراحل جمع آوری بیوپسی های معده 55 1-2-3 استخراج DNA از بیوپسی های معده 57 2-2-4 بررسی ژن های hpa A,babA2 ,hsp 70 با روش مولکولی PCR 59 فصل سوم نتايج 66 فصل چهارم بحث 75 نتيجه گيري 79 پيشنهادات 79 منابع 80 خلاصه انگليسي فهرست جداول عنوان صفحه جدول1-1: گونه هاي هليكو باكتر مرتبط با بيماريهاي انسان 15 جدول 1-2 :گونه هاي هليكو باكتر برحسب قرارگيري در دستگاه گوارش 16 جدول 1-3: ادهزين ها و پروتئين هاي موثر در بيماريزايي هليكو باكتر پيلوري 32 جدول 1-4: فاكتورهاي بيماريزا 39 جدول 1-5: : مقايسه مشخصات و اختصاصات روشهاي متداول در تشخيص به هليكو باكتر پيلوري 56 فهرست تصاوير عنوان صفحه تصوير 1-1: وارن و مارشال در سال 1984 11 تصویر 1-2 :نمایش هلیکو باکترپیلوری در بافت معده 11 تصوير 1-3: رنگ آميزي نقره - هليكو باكتر پيلوري در ترشحات موكوسي معده سلولهاي اپيتليال 12 اين تصوير توسط دكتر مارشال از بيوپسي معده 8 روز بعد از كشت مي باشد تصوير 1-4: شكل شماتيك هليكو باكتر پيلوري 21 تصوير 1-5: ورود هليكو باكتر پيلوري در سلولهاي اپيتليال 28 تصوير 1-6: روند سرطاني شدن توسط هليكو باكتر پيلوري 42 تصوير 1 -7: سير طبيعي عفونت هليكو باكتر پيلوری 42 تصوي1-8: نمايش شماتيك از فاكتورهايي كه در پاتولوژي معده و پيامدهاي ناشي از عفونت هليكو باكتر پيلوري شركت دارند 45 تصوير 1-9: نمايش آندوسكوپيك از زخم معده 45 فهرست نمودارها عنوان صفحه نمودار3-1 :فراوانی ژن هایHpa, Hsp70,BabA2درجنس زن و مرد 69 نمودار 3-2:فراوانی ژن های Hpa,Hsp70,BabA2براساس قومیت 69 نمودار3-3: فراوانی ژن های Hpa,Hsp70,BabA2براساس بیماری 70 نمودار3-4فراوانی هلیکوباکتر پیلوری دربیماری های گاستریت ,زخم معده ,سرطان معده 72 نمودار 3-5:فراوانی موارد مثبت ژن های BabA2,Hpa,Hsp70 73